![[A03] DNA 전기영동(Electrophoresis) 관련 이론 총집합](https://i.ytimg.com/vi/pwAqrZ7gzU8/hqdefault.jpg)
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주요 차이점
Southern Blotting과 Western Blotting의 주요 차이점은 Southern Blotting은 주어진 샘플에서 특정 DNA 조각을 탐지하는 데 사용되는 기술이지만 Western Blotting은 주어진 샘플에서 특정 단백질을 찾는 데 사용됩니다.
남부 얼룩 vs. 웨스턴 블로 팅
블로 팅은 과학자들이 혼합물 또는 시료에서 다른 유형의 분자를 분리하는 데 사용하는 기술입니다. 이 기술에서, 혼합물 내의 핵산 (DNA 및 RNA) 및 단백질과 같은 거대 분자는 겔 슬래브를 통해 이동한다. 여기서 미세한 입자는 큰 입자보다 빠르게 움직입니다. 이들 분자는 분자를 막 상으로 이동시키는 고정화 된 막의 표면에 대해 가압된다. 특정 물질의 검출, 즉 남부 블로 팅, 북부 블로 팅 및 웨스턴 블로 팅에 기초하여 상이한 유형의 블로 팅이 존재한다. Southern blotting은 DNA를 감지하는 데 사용되는 blotting 유형이며 웨스턴 blotting은 단백질을 찾는 데 사용됩니다. Southern blotting은 1975 년 Edward M. Southern에 의해 개발되었습니다. 따라서 Southern blotting이라고합니다. 반면, 웨스턴 블 롯팅은 1979 년 스탠포드 대학의 George Stark 그룹이 개발했습니다.이 이름은 남부 블 롯팅과 일치하는 데 사용되었습니다. 서던 블 롯팅은 특정 DNA 서열을 찾는 데 사용되는 반면 서부 블 롯팅은 특정 아미노산 또는 단백질 서열을 찾는 데 사용됩니다.
비교 차트
| 남부 얼룩 | 웨스턴 블로 팅 |
| 주어진 혼합물에서 특정 DNA 서열을 찾는 데 사용되는 기술을 서던 블 롯팅이라고합니다. | 주어진 혼합물에서 단백질의 특정 아미노산 서열을 찾는 데 사용되는 기술을 서던 블 롯팅 (Southern blotting)이라고합니다. |
| 에 의해 개발 | |
| Southern blotting은 1975 년 Edward M. Southern에 의해 개발되었습니다. | Western blotting은 1979 년 Stanford University의 George Stark 그룹이 개발했습니다. |
| 탐지 유형 | |
| Southern blotting은 특정 DNA 서열을 찾는 데 사용됩니다. | 웨스턴 블 롯팅은 특정 아미노산 또는 단백질 서열을 찾는 데 사용됩니다. |
| 원리 | |
| 그것은 혼성화의 원리에서 작동합니다. | 면역 검출 방법 또는 항원-항체 상호 작용의 원리에 따라 작동합니다. |
| 조사 | |
| 단일 가닥 DNA 또는 때로는 RNA가 프로브로 사용됩니다. | 1 차 및 2 차 항체는 프로브로 사용됩니다. |
| 겔 전기 영동 | |
| 아가 로스 겔 전기 영동은 서던 블 롯팅에 사용됩니다. | 웨스턴 블 롯팅에서 단백질을 분리하는 데 사용되는 SDS PAGE / 폴리 아크릴 아미드 겔 |
| 블로 팅 절차 | |
| 남부 블로 팅은 모세관 이송 절차를 따릅니다. | 웨스턴 블로 팅은 전기 전송 절차를 따릅니다. |
| 견본 | |
| 서던 블 롯팅 동안 샘플을 변성해야합니다. | 웨스턴 블 롯팅 동안, 샘플은 본래 상태에 있어야한다. |
| 블로킹 | |
| 블로킹과 같은 단계는 남부 블로 팅과 관련이 없습니다. | 웨스턴 블 롯팅 동안, 비특이적 항체 부위는 분유 또는 소 혈청 알부민 (BSA)의 도움으로 니트로 셀룰로오스 종이상에서 차단된다. |
| 라벨링 방법 | |
| 남부 블로 팅에 사용되는 일반적인 표지 방법은 발색 염료 또는 방사성 표지 또는 형광 표지 등을 사용하는 것입니다. | 웨스턴 블 롯팅에 사용되는 표지 방법은 형광 표지 된 항체 또는 방사성 표지, 발색성 염료 또는 디아 미노 벤지딘의 형성 등의 사용이다. |
| 탐지 방법 | |
| 남부 블로 팅의 검출 방법으로는 빛의 검출, 오토 라디오 그래프 및 색의 변화가 사용됩니다. | 웨스턴 블 롯팅에서의 검출 방법은 색의 변화 및 광 검출 등이다. |
| 신청 | |
| Southern blotting은 DNA 감지, 친자 검사, DNA 핑거링, 희생자 식별, 범죄자 식별, 감염원 찾기 및 돌연변이 또는 유전자 재 배열 등을 식별하는 데 사용됩니다. | 웨스턴 블 롯팅은 혼합물에서 단백질의 수를 찾고 혈청에 HIV, 바이러스 및 박테리아 등의 존재를 감지하고 결함이있는 단백질을 발견하고 헤르페스, B 형 간염, 라임에 대한 확실한 측정법으로 사용됩니다. 질병 및 크로이츠 펠트-야콥병 등 |
남부 얼룩은 무엇입니까?
Southern blotting은 Edwin Southern이 제공 한 가장 오래된 blotting 방법으로 Southern blotting이라고합니다. 주어진 샘플 또는 혼합물에서 특정 DNA 서열을 찾는 데 사용됩니다. 서던 블 롯팅 단계에는 전기 영동, 전이 및 특정 서열의 검출이 포함됩니다. 우선, DNA는 특정 제한 효소의 도움으로 단편화됩니다. 이어서, 원하는 DNA 단편을 겔 전기 영동을 통해 분리한다. 이들 단편은 2 개의 DNA 가닥을 분리하기 위해 알칼리 용액, 예를 들어 NaOH 등의 도움으로 변성된다. 이러한 단일 가닥 DNA 단편은이어서 블로 팅 공정을 통해 막으로 옮겼다. 이 막-결합 DNA는 표지 된 프로브로 처리된다. 이 프로브는 오토 라디오 그램 등으로 시각화 할 수있는 멤브레인 DNA의 상보 적 가닥에 부착됩니다.
웨스턴 블로 팅이란??
웨스턴 블로 팅 방법은 스탠포드 대학의 George Stark 그룹이 발명 한 것으로 단백질에서 특정 아미노산 서열을 식별하는 데 사용됩니다. 단백질 오점 또는 면역 블 롯팅이라고도합니다. 웨스턴 블 롯팅 동안의 단계는 전기 영동, 전이 및 특정 단백질의 검출이다. 우선, 혼합물을 균질화하십시오. 그런 다음 전기 영동을 사용하여 관심있는 분자를 분리하십시오. 이들 분자를 막에 옮기고 특정 프로브를 사용하여 특정 단백질을 확인하십시오.
주요 차이점
- 주어진 혼합물에서 특정 DNA 서열을 찾는 데 사용되는 기술은 서던 블 롯팅 (Southern blotting)으로 알려진 반면, 주어진 혼합물에서 단백질의 특정 아미노산 서열을 찾는 데 사용되는 기술은 서던 블 롯팅 (Southern blotting)으로 알려져 있습니다.
- Southern blotting은 1975 년 Edward M. Southern에 의해 개발되었으므로 Southern blotting으로 알려져 있습니다. 반면, 웨스턴 블 롯팅은 1979 년 스탠포드 대학의 George Stark 그룹이 개발했습니다.
- Southern blotting은 특정 DNA 서열을 찾는 데 사용됩니다. 반대로, 웨스턴 블 롯팅은 특정 아미노산 또는 단백질 서열을 찾기 위해 사용된다.
- Southern blotting은 플립 측면에서의 하이브리드 화 원리에 따라 작동합니다. 웨스턴 블 롯팅은 면역 검출 방법 또는 항원-항체 상호 작용의 원리에 작용한다.
- 단일 가닥 DNA 또는 때때로 RNA는 다른 쪽의 남부 블로 팅에서 프로브로 사용되며, 웨스턴 블로 팅에서는 1 차 및 2 차 항체가 프로브로 사용됩니다.
- 아가 로스 겔 전기 영동은 남부 블로 팅에서 사용되는 반면 SDS PAGE / 폴리 아크릴 아미드 겔은 웨스턴 블로 팅에서 단백질을 분리하는 데 사용됩니다.
- 반면에 남부 블로 팅은 모세관 이송 절차를 따릅니다. 웨스턴 블로 팅은 전기 전송 절차를 따릅니다.
- 서던 블 롯팅 동안 샘플은 변성되어야하지만 서부 블 롯팅 동안 샘플은 본래 상태에 있어야합니다.
- 블로킹과 같은 단계는 플립 사이드의 남부 블로 팅에 관여하지 않으며, 웨스턴 블로 팅 동안 비특이적 항체 부위는 분유 또는 소 혈청 알부민 (BSA)의 도움으로 니트로 셀룰로오스 종이에서 차단됩니다.
- 남부 블로 팅에 사용되는 일반적인 라벨링 방법은 발색 염료 또는 방사성 라벨링 또는 형광 라벨링 등을 사용하는 반면, 웨스턴 블로 팅에 사용되는 라벨링 방법은 형광 라벨링 된 항체 또는 방사선 라벨링, chromogenic 염료 또는 디아 미노 벤지딘 형성 등을 사용하는 것입니다.
- 서부 블로 팅에서의 검출 방법은 색상의 변화 및 빛의 검출 등인 반면, 빛의 검출, 오토 라디오 그래프 및 색상의 변화는 남부 블로 팅의 검출 방법으로 사용된다.
- Southern blotting은 DNA 탐지, 친자 확인 검사, DNA 핑거링, 희생자 식별, 범죄자 식별, 감염원 찾기 및 돌연변이 또는 유전자 재 배열 등을 식별하는 데 사용됩니다. 반대로 Western blotting은 단백질의 수를 찾기 위해 사용됩니다. 혈청에 HIV, 바이러스 및 박테리아 등이 있는지 감지하고 결함이있는 단백질을 찾아 헤르페스, B 형 간염, 라임 병, 크로이츠 펠트-야콥병 등에 대한 확실한 측정법으로 사용합니다.
결론
상기 논의는 남부 블로 팅이 샘플에서 특정 DNA 세그먼트를 찾는 데 사용되는 가장 오래된 블로 팅 기술인 반면, 웨스턴 블로 팅은 나중에 발견되어 특정 서열의 아미노산 또는 특정 단백질을 확인하는데 사용된다는 것을 요약한다.
